Detección del gen ermB asociado a la resistencia a macrólidos en cepas de Campylobacter aisladas de pollos comercializados en Lima, Perú

Abstract

[RESUMEN]. Objetivo. Detectar la presencia del gen ermB asociado a la resistencia a macrólidos en cepas de Campylobacter spp. aisladas de pollos comercializados en Lima, Perú. Métodos. Se analizaron 120 muestras de piel de pollo provenientes de tres mercados de los distritos de San Martín de Porres (n = 30), Santa Anita (n = 20) e Independencia (n = 70), ubicados en la Provincia de Lima, Perú. Se realizó el análisis microbiológico de las muestras según las recomendaciones de la norma ISO 10272-1:2017. Para la confirmación por reacción en cadena de la polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés) de género y especie, se utilizaron los cebadores (primers) 16-rARN y GlyA e hipO, respectivamente. Para evaluar la sensibilidad antibiótica, se utilizó el agar Müller-Hinton sangre al 5% con sensidiscos de azitromicina (15 μg) y eritromicina (15 μg). La detección del gen ermB en cepas con fenotipos resistentes se realizó mediante PCR convencional. Resultados. Se obtuvo un total de 117 muestras positivas (97,5%), de las cuales 100% fueron compatibles con Campylobacter coli (prueba de hipurato negativa) y confirmadas por PCR. La evaluación de resistencia antibiótica en placa para azitromicina y eritromicina dio como resultado 100% de cepas con fenotipo de resistencia a estos macrólidos, mientras que la PCR para la detección del gen ermB indicó un total de 62 positivas (53%), que fueron confirmadas por secuenciamiento. Conclusiones. Estos resultados demuestran que las carcasas de pollo comercializadas en mercados de Lima presentan contaminación por C. coli con una alta resistencia a macrólidos, lo cual puede ser atribuido a la presencia del gen ermB.

[ABSTRACT]. Objective. To detect the presence of the ermB gene associated with macrolide resistance in Campylobacter spp. strains isolated from chickens marketed in Lima, Peru. Methods. 120 samples of chicken skin from three markets in the districts of San Martin de Porres (n = 30), Santa Anita (n = 20), and Independencia (n = 70), located in the Province of Lima, Peru, were analyzed. Microbiological analysis of the samples was carried out according to ISO standard 10272-1:2017. For the polymerase chain reaction (PCR) confirmation of genus and species, 16-rRNA and GlyA and hipO primers, respectively, were used. For the evaluation of antibiotic sensitivity, the Müller-Hinton agar with 5% blood, with sensi-discs for azithromycin (15 μg) and erythromycin (15 μg), was used. For detection of the ermB gene in strains with resistant phenotypes, conventional PCR was used. Results. A total of 117 positive samples (97.5%) were obtained; of these, 100% were compatible with Campylobacter coli (negative hippurate test) and confirmed by PCR. The plate-based assessment of antibiotic resistance to azithromycin and erythromycin resulted in 100% of strains with a phenotype that is resistant to these macrolides, while the PCR to detect the ermB gene indicated a total of 62 positives (53%), which were confirmed through sequencing. Conclusions. These results demonstrate that the chicken carcasses sold in markets in Lima present contamination by C. coli with high resistance to macrolides, which can be attributed to the presence of the ermB gene.

[RESUMO]. Objetivo. Detectar a presença do gene ermB associado à resistência a macrolídeos em cepas de Campylobacter spp. isoladas de frangos comercializados em Lima, no Peru. Métodos. Analisamos 120 amostras de pele de frango provenientes de três mercados nos distritos de San Martín de Porres (n=30), Santa Anita (n=20) e Independencia (n=70), situados na Província de Lima, no Peru. Realizamos uma análise microbiológica das amostras de acordo com as recomendações da norma ISO 10272-1:2017. Para a confirmação do gênero e espécie por reação em cadeia da polimerase (PCR), utilizamos os primers 16-rRNA, GlyA e hypO. Para avaliar a sensibilidade antimicrobiana, utilizamos ágar de Müller-Hinton-sangue a 5% com discos de sensibilidade de azitromicina (15 μg) e eritromicina (15 μg). A detecção do gene ermB em cepas com fenótipos resistentes foi feita por PCR convencional. Resultados. Obtivemos um total de 117 amostras positivas (97,5%), das quais 100% foram compatíveis com Campylobacter coli (teste do hipurato negativo) e confirmadas por PCR. Na avaliação da resistência antimicrobiana em placa para azitromicina e eritromicina, 100% das cepas apresentaram fenótipo de resistência a estes macrolídeos, enquanto a PCR para a detecção do gene ermB indicou um total de 62 cepas positivas (53%), que foram confirmadas por sequenciamento. Conclusões. Estes resultados demonstram que as carcaças de frango comercializadas nos mercados de Lima apresentam contaminação por C. coli com alta resistência a macrolídeos, o que pode ser atribuído à presença do gene ermB.