Detección de secuencias genómicas del virus de la fiebre aftosa mediante la hibridación de ácidos nucleicos: un enfoque para el diagnóstico de infección persistente

Abstract

Se ha desarrollado un ensayo de hibridación capaz de detectar secuencias genómicas del virus de la fiebre aftosa (VFA) en muestras de cultivos de células infectadas o de fluidos esofágico-faríngeo (OP). El ensayo se basa en el uso de una sonda marcada de ADN complementaria a la región que codifica para la polimerasa del VFA. la sonda se obtuvo amplificando en E. coli un plásmido conteniendo el fragmento de ADN complementario (cADN) a la región de 6,3 a 7,8 kilobases del genoma del VFA. Debido al alto grado de homología de la secuencia de ácidos nucleicos en esta parte del genoma, fue posible la detección de los tres serotipos sudamericanos en un único ensayo de hibridación. Los resultados positivos obtenidos con muestras de OP de animales experimentalmente infectados extraídas a tiempos tardíos de la infección, durante los cuales la recuperación de virus era principalmente negativa, revelaron el considerable potencial de este método como complemento de los procedimientos convencionales de diagnóstico de infección persistente.